外泌體提取純化試劑盒(體液)
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 |
NW3212-30T | 外泌體提取純化試劑盒 (體液) | 30T |
【溫馨提示】:見我司整理的專注外泌體研究,外泌體提取專家,專注外泌體提取試劑盒產品專題。
產品簡介:
外泌體是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能,在特定細胞之間傳遞它們的效應物或信號分子;然而其構造、效應物組成以及所參與的生物學通路目前尚不明晰。
外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。由本公司自主開發的外泌體快速提取試劑盒,組分經過優化處理,適用于腦脊液、羊水、乳汁、唾液、肺泡灌洗液以及鼻腔盥洗液等體液中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,可用于電鏡分析、NTA粒徑分析、核酸分析、蛋白分析、細胞學實驗和動物實驗等。
保存條件:
4℃保存(一年有效)
保存條件:
室溫保存,2年有效。
產品組成:
名稱 | 規格 |
Exosome Concentration Solution* | 18 mL |
Exosome Purification Filter* | 30 Tubes |
* Nuclease-free, Sterile
自備材料:
高速離心機,1×PBS緩沖液(無菌)。
產品使用:
一、樣品預處理
1. 取樣:如果是凍存樣品,從冰箱取出后于25℃水浴中進行解凍,將完全融化后的樣品置于冰上;如果是新鮮樣品,收集樣品后置于冰上;
2. 樣品初始用量:(單次提取時的樣品量)
樣品名稱 | 最低量 |
肺泡灌洗液 | 1.0 mL |
腹 水 | 1.0 mL |
3. 離心去細胞碎片:將樣品轉移至離心管中,于4℃以3000 g離心10 min,去除樣品中的細胞碎片;
4. 上清液轉移:去除細胞碎片的離心上清液轉移到新的離心管中;
5. 離心去雜質:轉移后的上清液于4℃以10000 g離心10 min,去除樣品中雜質,將離心
后的上清液轉移至新的離心管中。(注:若沉淀較多,可10000g/10min離心多次至無明顯沉淀,每次取離心上清液)
二、提取外泌體
1. 上清液預處理:在去除雜質的離心上清液中加入Exosome Concentration Solution(ECS
試劑),具體的加入劑量如下(注:其他劑量規格請根據表中的試劑用量等比例換算)
樣品名稱 | 樣品劑量 | ECS劑量 |
肺泡灌洗液 | 2.0 mL | 0.5 mL |
腹 水 | 2.0 mL | 0.5 mL |
2. 溶液混合:加入ECS試劑后將離心管蓋緊,通過渦旋振蕩器混勻1 min,再放置于4℃靜置2 h;
3. 沉淀外泌體:取出裝有混合液的離心管于4℃以10000 g離心60 min,棄上清,沉淀中富含外泌體顆粒;(注:盡可能吸凈上清液)
4. 外泌體重懸:取1×PBS均勻吹打離心沉淀物(具體加入劑量如下表),待其溶解后,將重懸液轉移至新的1.5 mL離心管中;
樣品體積 | 加入PBS劑量 |
2.0 mL | 0.2 mL |
(注:其他劑量請根據表中的試劑用量等比例換算)
5. 收獲外泌體顆粒:將含有重懸液的1.5mL離心管于4℃以12000 g離心2 min,保留上清液,該上清液中富含外泌體顆粒。(注:若沉淀較多,可12000 g /2min離心多次至無明顯沉淀,每次取離心上清液)
三、純化外泌體
1. 純化外泌體:將收獲的外泌體顆粒粗品轉入Exosome Purification Filter(EPF柱)上室中,于4℃以3000 g離心10 min,離心后收集EPF柱管底的液體,此液體即為純化后的外泌體顆粒;(注:EPF柱不可重復使用)
2. 外泌體的保存:純化后的外泌體以50-100μL進行分裝保存于-80℃低溫冰箱中,以備后續實驗使用。
注意事項:
1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產品僅用于生命科學研究,不得用于醫學診斷及其他用途!
相關產品:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝規格 |
120ml | ||
20T | ||
20T | ||
20T | ||
30T | ||
20T | ||
20T | ||
20T | ||
30T | ||
20T | ||
5T | ||
20T | ||
20T | ||
20T | ||
20T |