專注外泌體研究，外泌體提取專家，專注外泌體提取試劑盒

一、外泌體提取試劑盒：

外泌體（Exosome）是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡（30-150 nm），在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能，在特定細胞之間傳遞它們的效應物或信號分子；然而其構造、效應物組成以及所參與的生物學通路目前尚不明晰。

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。由本公司自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑，組分經過優(yōu)化處理，適用于細胞培養(yǎng)上清液中的外泌體提取，可快速高效地獲得外泌體顆粒，可用于電鏡分析、NTA粒徑分析、核酸分析、蛋白分析、細胞學實驗和動物實驗等。

外泌體提取的不同方法：

沉淀法：

柱純法：

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二、高純度外泌體：

隨著應用型客戶對于外泌體純度要求的提高，本公司開發(fā)了大規(guī)模外泌體分離純化工藝，通過數十項質量控制和質量檢查，形成了高純度外泌體產品，直徑在30~200nm，可作為科研試劑用于透射電鏡分析、NTA粒徑分析、核酸蛋白分析、細胞學及動物學實驗等。包括293T外泌體，牛奶外泌體，干細胞外泌體，植物外泌體，以及定制化工程外泌體等等。

a)     293T外泌體是293T無血清培養(yǎng)細胞上清液中分離提取獲得的高純度外泌體顆粒。

b)     牛奶外泌體是從新鮮的牛奶中分離提純獲得，富含與細胞膜相同的磷脂雙分子層薄膜結構，緊密包裹細胞因子、生長因子等特異蛋白質、脂質、miRNADNA片段，可迅速打通細胞生物膜輸屏障精準識別、定位細胞損傷等。

c)      MSC細胞外泌體是無血清培養(yǎng)人臍帶間充質干細胞上清液中分離提取獲得的高純度外泌體顆粒。

d)     植物外泌體(姜黃)是姜黃汁液清液中分離提取獲得的高純度外泌體顆粒。

e)     植物外泌體(葡萄)是葡萄汁液清液中分離提取獲得的高純度外泌體顆粒。

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                                                   細胞外泌體生產工藝流程圖                                                   牛奶外泌體生產工藝流程圖

外泌體電鏡圖

外泌體NTA檢測圖

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三、外泌體獲取：

a)   去外泌體胎牛血清由無菌采集的健康胎牛血清過濾而成，去除≥99%的胎牛血清內源外泌體，并與處理前的胎牛血清具相同的細胞生長速率和形態(tài)。

產品質控：

b)    外泌體專用培養(yǎng)基是一款專門用于外泌體的培養(yǎng)基。產品含有HEPES，L-Glutamine, Pharm Grade Albumin, Hypoxanthine, Thymidine, Phenol Red, Glucose. 無動物源Xeno-free, Serum-free.不含生長因子（Growth factors），細胞培養(yǎng)過程中無需添加血清即可達到完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)狀態(tài)，有利于外泌體的收獲。

產品質控：

c)     外泌體專用間充質干細胞培養(yǎng)基（Mesenchymal Stem Cell, MSC）培養(yǎng)基及添加劑是一套適用于MSC細胞的無血清、化學成分限定的培養(yǎng)基，專門用于該類細胞外泌體的制備與生產。細胞培養(yǎng)過程中無需添加血清或血小板裂解物，減少外源顆粒的干擾，促進MSC細胞分泌外泌體。

d)    外泌體專用293無血清培養(yǎng)基是適用于HEK293 細胞培養(yǎng)的無血清、化學成分限定的培養(yǎng)基，專門用于HEK293細胞外泌體的研發(fā)與生產。細胞培養(yǎng)過程中無需添加血清，與配套補料搭配使用能夠促進 293 細胞大量分泌外泌體，較常規(guī) HEK293細胞培養(yǎng)基可提高產量5~10 倍。

產品質控：

e)   外泌體專用293無血清培養(yǎng)基補料與外泌體專用293無血清培養(yǎng)基配合使用，能夠提高HEK293細胞活率與密度，提高外泌體分泌量。

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四、外泌體研究常用試劑：

a)     DiR是一種親脂性的近紅外熒光花青染料。其兩個18-碳鏈可以與細胞膜或親脂性生物分子結合，從而進行特定、穩(wěn)定的染色。DiR所發(fā)射的紅外光可以高效地穿過細胞和組織，所以常用于活體成像和示蹤。

b)     PKH26外泌體紅色熒光標記染料能將帶有較長脂質尾巴的黃色-橙色熒光染料（PKH26）結合到細胞膜脂質區(qū)域上，是一種親脂性的紅色熒光膜染料。能增加染色效率，同時維持細胞活力，可用于外泌體的標記染色實驗，監(jiān)測細胞示蹤。

c)      PKH67外泌體綠色熒光標記染料能結合到細胞膜脂質區(qū)域上，是一種親脂性的綠色熒光膜染料。能增加染色效率，同時維持細胞活力，可用于外泌體的標記染色實驗，監(jiān)測細胞示蹤。

d)     Acoerela 的 Aco-600屬于水溶性、跨膜的共軛寡電解質（COEs）。這類親脂性染料具備獨特性能，能夠完全嵌入目標膜的脂質雙層，從根源上最大程度減少染料從目標中“泄漏”的情況發(fā)生。 在熒光特性方面，Aco-600 只有在與目標膜結合時， 才會呈現出顯著的熒光增強效果。同時，Aco-600 具有極高的水溶性，溶解在水性緩沖液時，既不會形成膠束，也不會產生納米顆粒。這一特性使其在納米流式分析以及細胞攝取實驗中，能夠有效規(guī)避假陽性結果的出現，確保實驗數據的準確性與可靠性。

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