慢病毒濃縮液(5×)
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 包裝規(guī)格 |
NW3204-50ml | 慢病毒濃縮液(5×) | 50ml |
NW3204-100ml | 慢病毒濃縮液(5×) | 100ml |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
慢病毒濃縮液是一種快速濃縮慢病毒的產(chǎn)品,使用未濃縮病毒上清與本產(chǎn)品低溫孵育后低速離心即可獲得濃縮病毒液。不同于傳統(tǒng)的耗時(shí)耗力的超濾、超速離心法,使用本產(chǎn)品操作簡(jiǎn)便、快捷、安全,回收率高。
高濃縮比:濃縮體積高達(dá)240倍,如:可將120mL的病毒上清濃縮至500uL;
高回收率:經(jīng)測(cè)試,病毒的回收率高達(dá)92%;
高濃縮滴度:經(jīng)測(cè)試,使用本產(chǎn)品濃縮后病毒滴度往往可達(dá)108或109高病毒;
高病毒活性:濃縮后病毒具有更佳的轉(zhuǎn)導(dǎo)效果。
保存條件:
2-8℃保存,1年有效。
產(chǎn)品使用:
1. 收集48 h和72 h的293T細(xì)胞慢病毒上清液,4℃, 2000 g 離心10 min。
2. 上清液用 0.45 μm 濾膜過(guò)濾,去除細(xì)胞碎片。
【注】:濾膜需使用低蛋白吸附的纖維素醋酸酯或聚醚砜(PES)膜。切忌用硝酸纖維素膜(NC)。
3. 按慢病毒過(guò)濾液體積:濃縮試劑體積= 4:1 比例混合,搖勻,4℃ 靜置過(guò)夜,或冰上孵育至少 3 h,適當(dāng)延長(zhǎng)孵育時(shí)間可提高慢病毒的回收率。
4. 完成孵育后,4℃,3500 g離心15 min,小心吸去上清液。
5. 用適量體積PBS輕輕反復(fù)吹吸病毒沉淀,重懸慢病毒。
6. 留少許病毒液測(cè)定滴度,其他分裝后保存于-80℃。
【注】:因凍融會(huì)顯著降低慢病毒活性,請(qǐng)務(wù)必分裝保存。
注意事項(xiàng):
1. 慢病毒相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作請(qǐng)?jiān)谏锇踩駜?nèi)完成。
2. 注意將濃縮試劑和病毒液充分混合。
3. 細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)對(duì)于病毒包裝至關(guān)重要,因此需保證良好的細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)和較少的細(xì)胞傳代次數(shù)。
4. 病毒切勿反復(fù)凍融,如果實(shí)在需要凍融,次數(shù)盡量不要超過(guò)3次,每?jī)鋈谝淮未蠹s有10%左右的病毒損失,應(yīng)按照每次使用的病毒量來(lái)分裝,保存于-80℃。保存時(shí)間盡量不要超過(guò)6個(gè)月。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅用于生命科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷及其他用途!