<NW3210> 外泌體提取純化試劑盒（尿液）

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外泌體提取純化試劑盒（尿液）
貨號：NW3210-2T；
NW3210-20T
品牌：NoninBio

促銷：￥600.00~5000.00

價格：￥600.00~5000.00

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規格：

2 T 20 T

外泌體提取試劑盒（尿液）

產品簡介：

外泌體是由細胞分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡（30-150 nm），在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能，在特定細胞之間傳遞它們的效應物或信號分子；然而其構造、效應物組成以及所參與的生物學通路目前尚不明晰。

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。由本公司自主開發的外泌體提取試劑盒，組分經過優化處理，適用于尿液中的外泌體提取，可快速高效地獲得外泌體顆粒，可用于電鏡分析、NTA 粒徑分析、核酸分析、蛋白分析、細胞學實驗和動物實驗等。

保存條件:

室溫保存，2年有效。

產品組成：

名稱	NW3210-2T	NW3210-20T
Exosome Concentration Solution*	12 mL	120 mL
Exosome Solution Buffer*	1 mL	10 mL
50 mL 離心過濾柱	2個	20個

* Nuclease-free, Sterile

自備材料：

高速離心機，渦旋振蕩器，50 mL離心管，1.5 mL離心管，1×PBS緩沖液（無菌）。

產品使用：

一、樣品預處理

1. 取樣：如果是凍存樣品，從冰箱取出后于25℃水浴中進行解凍，將完全融化后的樣品置于冰上，如果是新鮮樣品，收集樣品后置于冰上；

2. 樣品初始用量：單次提取時的尿液量建議不低于20 mL；

3. 離心去細胞碎片：將樣品轉移至離心管中，于 4℃以 3,000 ×g（~5,200 rpm**）離心10 min，去除樣品中的細胞碎片（注：若沉淀較多，可3,000 ×g，10 min 離心多次至無明顯沉淀，每次取離心上清液）；

**為約10 cm有效離心半徑的大離心機換算（≥15 mL離心管），下同。

4. 離心去雜質碎片：將離心上清液轉移至新的離心管中，于4℃以10,000 ×g（~9,500 rpm**）離心10 min，去除樣品中的雜質碎片；

5. 樣本過濾：去除雜質碎片的離心上清液轉移到 50 mL 離心過濾柱中，于4℃以3,000 ×g（~5,200 rpm**）離心10 min，取過濾柱下室液體（注：若上室中有殘留液體，可重復本步驟以獲得更多樣本量）；

6. 上清液轉移：去除雜質碎片的上清液轉移到新離心管中。

二、提取外泌體

1. 上清液預處理：在去除雜質的離心上清液中加入 Exosome Concentration Solution（ECS 試劑），具體的加入劑量為每20 mL尿液加4 mL ECS試劑；

2. 溶液混合：加入 ECS 試劑后將離心管蓋緊，通過渦旋振蕩器混勻1 min，再放置于4℃靜置８h以上（注：增加靜置時間可提高外泌體得率，但不可超過24 h）；

3. 沉淀外泌體：取出裝有混合液的離心管于4℃以10,000 ×g（~9,500 rpm**）離心60 min，棄上清，沉淀中富含外泌體顆粒（注：盡可能吸盡上清液）；

4. 再次離心：將含有沉淀的離心管再次于 4℃以 10,000 ×g（~9,500 rpm**）離心2 min，棄上清（注：盡可能吸盡上清液）；

5. 外泌體重懸：取合適量的 Exosome Solution Buffer（ESB試劑）均勻吹打離心沉淀物，待其溶解后，將重懸液轉移至新的1.5 mL離心管中（建議每20 mL尿液用200 μL 左右ESB試劑重懸）；

6. 收獲外泌體顆粒：將含有重懸液的1.5 mL離心管于4℃ 以12,000 ×g（~12,400 rpm*）離心2 min，保留上清液，其中富含外泌體顆粒（注：若沉淀較多，可12,000 ×g，2min離心多次至無明顯沉淀，每次取上清液）。

*為約7 cm有效離心半徑的小離心機換算（≤2 mL離心管）。

7. 外泌體的保存：純化后的外泌體以合適體積進行分裝凍存于-80℃低溫冰箱中，以備后續實驗使用。

注意事項：

1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本產品僅用于生命科學研究，不得用于醫學診斷及其他用途！

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