<NW3201> 外泌體熒光染料（DiR）

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外泌體熒光染料（DiR）
貨號(hào)：NW3201
規(guī)格：200 μL（1 mM）
品牌：NoninBio

促銷(xiāo)：￥500.00

價(jià)格：￥625.00

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貨號(hào)：

NW3201

規(guī)格：

200 μL

外泌體熒光染料a（DiR）

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱(chēng)	包裝規(guī)格
NW3201	外泌體熒光染料（DiR）	200 μL（1mM）

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

DiR是一種親脂性的近紅外熒光花青染料。其兩個(gè)18-碳鏈可以與細(xì)胞膜或親脂性生物分子結(jié)合，從而進(jìn)行特定、穩(wěn)定的染色。DiR所發(fā)射的紅外光可以高效地穿過(guò)細(xì)胞和組織，所以常用于活體成像和示蹤。

產(chǎn)品特性：

1. 分子式：C63 H101 IN2

2. 分子量：1013.4

3. 溶劑：DMSO

4. λex/λem(MeOH) = 748/780 nm

保存條件:

-20℃避光保存，1年有效。

產(chǎn)品使用：

一、染料工作液制備

將“外泌體熒光標(biāo)記染料（DiR）”用1×PBS稀釋10 倍，配制成濃度為100 μM的染料工作液。

二、外泌體染色

1. 在外泌體懸液中加入染料工作液，建議染料終濃度為 10~20 μM（按照終體積的1/5~1/10加入100 μM的染料工作液）；

2. 加入染料工作液后將離心管蓋緊，通過(guò)渦旋振蕩器混勻 1 min，再放置于37℃孵育30 min；

3. 向孵育后的外泌體-染料復(fù)合物中加入10 mL的1×PBS 混勻；

4. 按照外泌體提取方法再次提取外泌體以去除游離染料；

5. 取200 μL 1×PBS重懸沉淀物，即為染色后的外泌體。

注意事項(xiàng)：

1. 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)注意避光，以減緩熒光淬滅。

2. 染料工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，不能提前配制，否則將影響染色效果。

3. DiR染色固定細(xì)胞或組織樣品時(shí)，樣品宜使用4%多聚甲醛進(jìn)行固定，使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?huì)導(dǎo)致熒光背景較高。

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

常見(jiàn)問(wèn)題：

1. 活體成像對(duì)外泌體濃度要求較高，建議用于染料標(biāo)記的外泌體原始濃度達(dá)到0.5~1.5 μg/μL，外泌體濃度過(guò)低實(shí)驗(yàn)失敗風(fēng)險(xiǎn)較高。

2. 外泌體染色步驟中去除游離染料的第3、4步必不可少，以避免游離染料對(duì)后期實(shí)驗(yàn)的干擾。這一步相當(dāng)于重新提取外泌體，所有外泌體提取純化方式都適用。

3. DiR碘化物（DiR染料）的發(fā)射波長(zhǎng)肉眼不可見(jiàn)，需要使用配備CCD鏡頭或其他設(shè)備的近紅外檢測(cè)儀器，建議使用活體成像儀。

4. 建議染料標(biāo)記的外泌體在注射后24 h內(nèi)設(shè)置梯度時(shí)間進(jìn)行觀(guān)測(cè)，多數(shù)情況下，在注射后2~8 h熒光強(qiáng)度達(dá)到峰值。為保證觀(guān)察結(jié)果，小動(dòng)物需要做剃毛處理。

5. 由于以下兩個(gè)原因，建議制備2倍于活體成像或示蹤實(shí)驗(yàn)所需外泌體量以進(jìn)行染料標(biāo)記：1)外泌體染色效率難以達(dá)到100%；2)在去游離染料過(guò)程中無(wú)法避免外泌體的損失。

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