核酸助沉劑糖原（20mg/ml）

Glycogen (20mg/ml), Molecular Biology Grade 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

糖原（Glycogen）是動(dòng)物細(xì)胞合成的葡萄糖分枝狀聚合物，用于能量?jī)?chǔ)藏和釋放。是淀粉類似物，結(jié)構(gòu)與支鏈淀粉類似，用作二次長(zhǎng)期儲(chǔ)能。用作核酸沉淀的載體物質(zhì)。一種惰性載體，能明顯提高乙醇沉淀法中提取DNA和RNA的回收率。糖原不溶于乙醇，形成捕獲目的核酸的沉淀。離心后形成肉眼可見(jiàn)沉淀，從而使得處理沉淀下來(lái)核酸變得更為方便。與傳統(tǒng)的tRNA輔助沉淀法相比，糖原從稀釋溶液中沉淀核酸量效率更高。另外，由于糖原本身不含DNA或RNA，用其沉淀所得的核酸更適合用于后續(xù)的PCR、RT-PCR以及內(nèi)切酶等核酸酶反應(yīng)。

本品為糖原溶液，濃度為20mg/ml，不含DNase和RNase，達(dá)分子生物學(xué)級(jí)別。適用于DNA或RNA沉淀用的輔助沉淀劑，通常每1μl糖原（20mg/ml）可把pg級(jí)的DNA或RNA從1ml溶液體系中沉淀出來(lái)。

保存條件: 

-20℃保存，至少1年有效。 

產(chǎn)品使用（適用于稀釋溶液中沉淀DNA）：

【注①】：以下步驟適用于DNA沉淀，對(duì)于RNA沉淀需特別注意使用無(wú)RNA酶的吸頭、離心管和水。

【注②】：以下步驟僅做參考，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際實(shí)驗(yàn)需求和方法來(lái)優(yōu)化糖原的工作濃度以及相應(yīng)步驟。

1）往DNA溶液中加入1/10體積的3M乙酸鈉（或2M氯化鈉，或5M乙酸銨）。

2）加入糖原（5mg/ml）使其終濃度為0.02~1mg/ml。

【注①】：糖原的工作濃度請(qǐng)參考文獻(xiàn)或特定的操作說(shuō)明進(jìn)行。對(duì)于寡核苷酸，建議工作濃度不要超過(guò)1mg/ml。

3）加入1倍體積的異丙醇（或2.5倍體積的乙醇）到溶液內(nèi)，輕輕混勻。＜200bpDNA片段需用乙醇。

4）于-20℃孵育混合物60min，或-70℃孵育30min。更長(zhǎng)的孵育時(shí)間和更低溫度能產(chǎn)生更好的核酸回收率。

5）10,000rpm離心混合物10~15min。

6）吸走上清。

7）用70%冰乙醇清洗沉淀。

8）晾干沉淀。避免過(guò)度晾干沉淀，否則需花費(fèi)更長(zhǎng)時(shí)間來(lái)溶解。

9）用不含核酸酶的水或TEbuffer來(lái)溶解DNA。

注意事項(xiàng)：

1.      對(duì)于單次用量比較少的用戶，建議收到本品第一次使用時(shí)，小量分裝凍存，減少反復(fù)凍融次數(shù)。

2.      有文獻(xiàn)報(bào)道，經(jīng)糖原沉淀的連接反應(yīng)產(chǎn)物，幾乎不會(huì)干擾后續(xù)的細(xì)菌轉(zhuǎn)化。糖原（1μg/ml）不會(huì)抑制TdT活性，糖原（＜2mg/ml）幾乎不會(huì)影響反轉(zhuǎn)錄酶活性，糖原（0.02mg/ml）不會(huì)抑制T4 RNA連接酶活性。

3.      為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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