DAPI 細胞核探針

溫馨提示：見我司整理的細胞核（Cell Nuclear）熒光探針產品專題。

產品簡介：

DAPI，英文全稱4’,6-Diamidino-2’-phenylindole，中文全稱4’,6-聯脒-2’-苯基吲哚，是一種藍色熒光染料，選擇性結合雙鏈DNA的小溝區（優先結合AT富集的DNA）形成穩定的復合物，產生比DAPI約強20倍的熒光。DAPI的最大激發/發射波長為340

/488nm，DAPI-DNA復合物的最大激發/發射波長為364/454nm，通常用作熒光顯微術、流式細胞術和染色體染色的細胞核復染劑。由于對DNA的高親和性，DAPI還常常被用在細胞計數、凋亡檢測、支原體污染檢測、基于DNA內含物的細胞分選，以及高內涵成像分析中的核分割工具。雖然高濃度情況下DAPI能夠進入活細胞，但DAPI不具細胞膜滲透性，通常情況用來染固定細胞。對于活細胞染色，Hoechst 33342（貨號：NBS8032-10mg）是一種受歡迎的具細胞膜滲透性的核復染劑。

本品為DAPI的二鹽酸鹽（2HCl），粉末形式，易溶于水。用于細胞核染色時，推薦工作濃度為0.5-10μg/ml。

保存條件: 

室溫干燥避光保存，2年有效。

產品特性：

1） CAS NO：28718-90-3

2） 英文同義名：DAPI dihydrochloride; 4’,6-Diamidino-2’-phenylindole dihydrochloride; 2-(4-Amidinophenyl)- 6-indolecarbamidine dihydrochloride; 4′,6-Diamidino-2-phenylindole dihydrochloride;

3） 中文同義名：DAPI二鹽酸鹽；4’,6-聯脒-2’-苯基吲哚二鹽酸鹽；

4） 分子式：C₁₆H₁₅N₅· 2HCl

5） 分子量：350.25

6） 純度：>90% (from N)

7） 溶解性：溶于水（1-5mg/ml）

8） Ex/Em：340/488nm（DAPI）；364/454nm（DAPI-DNA）；

儲存液配制：

用雙蒸水溶解，配制1-5mg/ml的儲存液。-20oC避光保存1年，建議分裝保存，避免反復凍融。【注意】：本品不可以用緩沖液直接溶解。

使用方法：

1. 工作液配制

用雙蒸水或PBS稀釋母液，配制成所需要的工作濃度（0.5-10μg/ml）。

2. 固定的細胞或組織染色

對于固定的細胞或組織樣品，固定后，適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進行。如果不需要進行其它染色，則直接進行DAPI染色。

2.1 對于貼壁細胞或組織切片：加入適量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞：至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5min。

2.2 吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5min。

2.3 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。Ex/Em=364/454nm。

3. 活的細胞或組織染色

3.1 細胞培養物中加入適量DAPI染色液，約1/10細胞培養基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。對于六孔板，一個孔通常需加入1ml染色液；對于96孔板，一個孔通常需加入100μl染色液。

3.2 在37℃培養細胞10～20min。

3.3 用PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。

3.4 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。Ex/Em=364/454nm。

注意事項：

1.      DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。

2.      熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。

3.      為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。