MazF 

產品簡介：

MazF 是 E.coli 毒素 - 抗毒素系統中的毒素蛋白，特異性切斷單鏈RNA 中 ACA 序列 5' 末端的核酸內切酶，不能切斷雙鏈 RNA、雙鏈DNA 及單鏈 DNA。 

識別位點：

ACA
5'...↓ A C A ...3'

產品組成：

保存條件: 

-20℃保存，2年有效。

適用范圍：

1. 高分辨率 m6A 甲基化分析；

2. mRNA 藥物序列分析。

活性定義:

1活性單位 (U) 是指在37℃溫度和pH7.5條件下，將1 pmol的標準底物 (ROX-5'

-GATAUACATATCT-eclipse；下劃線部分是RNA 序列）在10 min內完全分解的酶量。

蛋白純度：

經SDS-PAGE 凝膠電泳檢測，蛋白純度不低于95%。

RNase活性：

將20 U MazF與 40 ng ssRNA 在 37℃溫育1 h，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測，ssRNA片段無變化。

DNase活性：

將20 U MazF與 15 ng雙鏈DNA在37℃溫育16 h，使用瓊脂糖凝膠電泳檢測，DNA片段無變化。

使用方法：

1. 推薦體系

① 在冰上按如下建議的加樣順序配制反應體系：

② ssRNA在37℃中保溫15 min被完全切斷。

注意事項：

1.      MazF特異性切斷含ACA序列的ssRNA，但是也會受AC位點兩側序列的影響可能切斷AC位點；

2.      MazF不能切斷dsRNA。因此，由于RNA二級結構的影響，MazF不能切斷所有的ACA位點序列；

3.      在反應液中添加鹽，特別是Mg2+等二價陽離子時，MazF的活性會受到抑制。DTT不影響反應液中的酶活性；

4.      MazF切斷的片段不能使用RNA Ligase直接進行連接反應，因為片段的兩個末端分別是2', 3'-cyclic phosphate和 5'-OH。

5.      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本產品僅用于生命科學研究，不得用于醫學診斷及其他用途！