間充質干細胞成骨分化染色試劑盒

Osteo-dye for osteocytes staining kit in osteogenic differentiation

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【包裝規格】

【預期用途】 

適用于間充質干細胞成骨分化后的骨細胞染色， 尤其適合作為BI MSCgo^TM Osteogenic XF ( BI 05-440-1B 或 05-442-1B) 成骨分化后的染色驗證之用。 

【檢驗原理】 

茜素紅 S (Alizarin Red S) 是一種常用的示鈣染劑，廣泛用作生物醫學樣本中含鈣目標物的染色檢驗。游離的鈣離子可與茜素紅 S 形成紅色沉淀；固著的鈣則會被直接染成紅色。 在成骨誘導分化作用下，間充質干細胞 (MSC, Mesenchymal Stem Cell) 會被逐漸分化為骨細胞(Osteoblasts)，包括鈣化骨節(鈣鹽結晶體) 的形成 (Calcium nodules formation) 和細胞的泌鈣反應 (Calcium secretion)。兩者均可被茜素紅S染成紅色。 

【主要組成成分】 

主要成分為茜素紅S。 

【適用范圍】 

間充質干細胞成骨分化后的骨細胞染色驗證。 

【樣本要求】 

待檢的樣本應為間充質干細胞成骨分化后形成的骨細胞。推薦使用 BI MSCgoTM Osteogenic XF 進行成骨分化誘導。 

【使用方法】 

以操作一個T25 flask為例： 

1. 吸棄分化培養基，加入 1 ml DPBS (VC C3590-0500) 輕輕潤洗培養瓶底面。 

2. 吸棄 DPBS，加入 3 ml Fixation solution (C37C1-0020)，輕輕晃動培養瓶，使底面浸潤 均勻。室溫下靜置30 分鐘。 

3. 吸棄Fixation solution ；加入3 ml Wash I (C37C2-0050)，潤洗細胞2-3次。 

4. 吸棄Wash I，加入3 ml Staining Solution (C37C3-0020)，底面浸潤均勻，室溫染色30分 鐘。 

5. 吸棄Staining Solution，加入 3 ml Wash II (C37C4-0050)，潤洗細胞2-3次。 

6. 吸棄 Wash II，加入 1 ml Inspection Solution (C37C5-0010)，置于顯微鏡下觀察、 拍照 (分化后的骨細胞會被染成橘紅色)。

【檢驗結果的解釋】 

在顯微鏡下，可觀察到鈣化骨節與茜素紅染料結合后呈現紅色或橘紅色（如下圖所示）。被染色細胞的數量和染色的深度會受到多種因素的影響，例如：細胞類型、細胞代數、分化時間和培養條件等。

【儲存條件及有效期】 

本產品應在 2-8°C 儲存，并在產品標簽上注明 的有效期內使用。 有效期為18個月。 藍冰運輸。

【注意事項】 

1. 嚴禁內服，不能用嘴吸液。 

2. 試劑包裝如有破損，嚴禁使用。 

3. 操作人員在檢驗時應做好防護。 

4. 與皮膚、粘膜接觸，請立即用自來水沖洗。 

5. 禁止使用超出規定有效期的產品。 

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僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。